Wissenschaftler halten eine Vielzahl von Zellen im Labor zu unserem Verständnis , wie Zellen wachsen hinzufügen , vermehren und sterben. Um die Zellen zu erhalten, regelmäßig Wissenschaftler unterteilen - Subkultur oder Split - sie in frischem Nährmedium . Subkultur
Zellen gezüchtet suspendiert in Wachstumsmedium oder an Kunststoff-Petrischalen oder Kolben. Wie wachsen sie Zellen dichter werden , verbrauchen Nährstoffe und scheiden Abfallprodukte in das Medium . Daher müssen die Zellen regelmäßig in kleineren Zahlen aufgeteilt und frisches Medium - . Regel an eine bestimmte Anzahl von Zellen pro Schale
Methode
Graf und verdünnen suspendierten Zellen in frisches Medium . Für anhaftenden Zellen , entfernen Sie verbrauchte Medium und vorsichtig waschen Zellen mit einer Kochsalzlösung Puffer . Expose Zellen ein Enzym oder Salzlösung auf Zell-Zell- und Zell- Verbindungen brechen Gericht - Trypsin wird am häufigsten verwendet . Die enzymatische Reaktion mit der Zugabe von tierischen Serum, Ort Zelle Mix in einem Rohr und Spin in einer Zentrifuge . Entfernen Flüssigkeit sanft resuspendieren Zellen in frischem Medium , zählen und verteilen sie an der erforderlichen Dichte .
Überlegungen
Subkultur Zellen in einer sterilen Umgebung mit steriler Ausrüstung bakterielle oder Pilz Kontamination zu vermeiden. Zelldichte , die Höhe der Zeit in Trypsin und Subkultur Frequenz sind alle abhängig vom Zelltyp . Verwenden Sie ein Mikroskop, um regelmäßig Zellen .
