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Protokoll für NIH 3T3

NIH3T3-Zellen werden in großem Umfang in Forschungslabors für Virologie, Zell-und Molekularbiologie Experimente verwendet. Die embryonalen Maus- Fibroblasten- Zelllinie wurde von George Todaro und Howard Green im Jahre 1962 an der New York University entwickelt. Medium

NIH3T3 Zellen wachsen auf Plastikschalen in einem 37 Grad Celsius Inkubator ( 99 Grad Fahrenheit ) angebracht. Ihr Wachstum Medium ist Dulbecco modifiziertem Eagle-Medium mit 10% Kälberserum - . Nicht die 10 % fötalem Rinderserum , dass andere Zelllinien bevorzugen
Propagation

Kluft NIH 3T3-Zellen alle 2 bis 3 Tage - es ist wichtig, dass sie nicht erlaubt werden, zu dicht werden. Entfernen Sie die verbrauchte Kulturmedium und waschen Sie die Schale mit Phosphat-gepufferter Kochsalzlösung . Inkubieren der Zellen in Trypsin , um die Zellen abzulösen und überwachen die Ablösung mit einem Mikroskop. Wenn die Zellen abgerundet sind und getrennt , leicht bewegen sie mit einer Pipette . In komplettem Wachstumsmedium , um die enzymatische Reaktion zu stoppen. Re - Platte die Zellen bei 300.000 Zellen pro 10 cm (3,9 Zoll) Gericht.
Verwendet

NIH3T3 werden verwendet, um Mausleukämievirus oder Funktion als wachsen immobilisierten Zellen oder Feeder-Schichten , die notwendig sind Wachstumsfaktoren liefern für Zellen wie Stammzellen und Keratinozyten . Sie wurden auf Spinnenseide in Experimenten entwickelt, um mit potenziellen Biomaterialien für die Geweberegeneration entdecken gewachsen.