Bakterien sind nützliche Werkzeuge in der Gentechnik . Durch die Verwendung von Plasmiden können kreisförmige Abschnitte austauschbar bakterielle DNA , Organismen, wie andere Bakterien , genetisch transformiert werden. Dieses Handbuch beschreibt die grundlegenden Methoden unter Verwendung von Bakterien für die Gentechnik von einem anderen Organismus beteiligt. Was Sie brauchen
Nicht-tödliche Bakterienart (vorzugsweise eine harmlose Variante von Escherichia coli)
Zweite nicht-tödliche Bakterienart
Petrischale
Bakterien Inkubator
Restriktionsenzyme für Zielgen
2 Sterile Schleifen
Hot Wasserbad
Reagenzglas
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Vorbereiten des Gens von Interesse
1
Besorgen Sie sich eine Probe der ersten Bakterien Spezies durch einen Abstrich der beiliegenden Kolonie mit einer sterilen Schleife .
2
Welle die geimpft Schleife in einem Reagenzglas durch ein Wasserbad bei etwa 48 Grad Celsius für fünf Sekunden.
3
Fügen Sie ein paar Milliliter Restriktionsenzym in das Reagenzglas und beheizt, geimpft Schleife . Diese Beschränkung Enzym variiert je nach dem Gen von Interesse , die zu den anderen Bakterienarten übertragen werden.
Umwandlung der Andere Bakterien Art
4
Tauchen Sie ein zweites sterile Schleife in eine Kolonie der zweiten Bakterienart , die eine, die umgewandelt werden soll.
5
verbreiten die Bakterien gleichmäßig über eine Petrischale mit Agarosemedium durch Verschieben der geimpft Schleife über die Agarose .
6
Lasst die Bakterien für zwei Tage in einem Inkubator , so dass Bakterienkolonien gebildet werden inkubieren .
7
Fügen Sie die Mischung zuvor erstellt haben , die das Gen von Interesse für die Petrischale mit der Bakterienkolonien .
8
Lasst die Bakterien für zwei Tage im Brutschrank inkubieren . Dies ermöglicht die Spezies , um die Aufnahme der Gene hinzugefügt, um die Schüssel und legen Sie sie in ihre Genome .
9
Überlegen Sie sich eine Methode, um die transformierten Bakterien zu testen , um zu sehen , wenn sie assimiliert die Gene . Zum Beispiel, wenn das Gen hinzugefügt Zuschüsse die Bakterien Resistenz gegen Antibiotika , kann es sinnvoll sein, Scheiben von Ampicillin auf die Agar-Platte hinzuzufügen. Wenn sie überleben, nahm sie das Gen .
