Wie zu reinigen und zu erneuern C8 HPLC Säule

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Wie zu reinigen und zu erneuern C8 HPLC Säule

Hochleistungs- Flüssigkeits-Chromatographie (HPLC) ist eine gängige Methode der Analyse im Labor , in dem eine Probe in ihre chemischen Bestandteile zerlegt wird wie durch eine Säule läuft . Die Kolonne ist mit einer porösen Verpackung typischerweise auf Silica Gels gefüllt . Ein Standard-Reverse- Phase-Säule , wie ein C8, kann manchmal verstopft oder verunreinigt wird. Solche Spalten können oft regeneriert mit ein paar einfachen Techniken . Things You
HPLC Instrument
Wasser
Methanol
Acetonitril
Isopropanol
Methylenchlorid
Hexan
brauchen anzeigen Weitere Anweisungen
Regenerating einer Spalte
1

Lösen Sie die Spalte gefoult und rückwärts seine Position , so dass die mobile Phase beginnt nun , was ist in der Regel der Ausgang der Säule . Bringen Sie eine Exit- Linie an das andere Ende der Säule ( das Ende, das war ursprünglich der Einlass ) , und führen Sie diese in einen Abfallbehälter .
2

Pump durch eine Reihe von Lösungsmitteln in der Reihenfolge abnehmender Polarität . Eine grundlegende empfohlen Serie mit Methanol zu starten, dann durch Acetonitril , Acetonitril /Isopropanol ( 75:25 ), Isopropanol , Methylenchlorid und Hexan Fortschritt. Wenn die mobile Phase ursprünglich sitzen in der Säule wurde ein Puffer , sollte eine Wäsche mit Wasser vorausgehen Methanol . Eine Strömungsgeschwindigkeit von 1 bis 2 ml pro Minute beträgt typischerweise geeignet , und ungefähr 10 Säulenvolumina pro Lösungsmittel sollte durch gepumpt werden. Die Säule Volumen der Innenraum nicht durch Verpackung entnommen und als ( 0,7 x pi x (ID /2 ) ^ 2 x L) , wobei ID die Spalte Innendurchmesser ist und L deren Länge.
< Br berechnet > Seite 3

Pump weitere 10 Säulenvolumen Isopropanol durch die Säule , um es für die Verwendung mit dem original mobile Phase vorzubereiten. Wenn die ursprüngliche mobile Phase wurde gepuffert , auch Pumpe Wasser durch die Säule nach dem Isopropanol vor der Rückkehr zum ursprünglichen gepufferte mobile Phase .
4

Trennen Sie die Spalte und umzukehren und schließen Sie es wieder so , dass es in seiner ist normale Konfiguration ( dh, mit der mobilen Phase in die Säule gepumpt wird ) . Schließen Sie den Ausgang der Säule zum Detektor.